اهداف مهم : تحقیقات بالینی- مولکولی در ارتباط با بیماری های ریه
هدف، انجام تحقیقات بالینی پیشگامانه و نوآورانه در زمینهی بیماریهای ریوی شامل: آسم، بیماریهای انسدادی مزمن ریوی (COPD)، سرطان ریه ، فشارخون ریوی (PAH) ، سل و سایر بیماریهای مرتبط با ریه و در ارتباط با بیولوژی مولکولی است. این مرکز تحقیقات گستردهای در پیشبرد تشخیص، پیشگیری، درمان و کنترل بیماریها بعمل می آورد تا قدمهای قابل قبولی در ارتقا سلامت ملی و جهانی بردارد. در این زمینه با ایجاد تسهیلات و ظرفیت های لازم، در انجام آموزش و پژوهش محققین از جمله دانشجویان کارشناسی ارشد و دکترا را به منظور دستیابی به اهداف مهم یاری میرساند.
اهداف آزمایشگاه:
1- پزشکی- مولکولی:
تکنیکهای آزمایشگاهی:
- PCR (Polymerase Chain Reaction): PCR به علت دارا بودن ویژگی و حساسیت بالا و سرعت و سهولت آن، جایگاه ویژهای درتحقیقات و تشخیص های مولکولی پیدا کرده است.PCR در محیط آزمایشگاه امکان تکثیر یک توالی معین از DNA را که بین دو توالی مشخص قراردارد، امکان پذیر میکند تا DNA از نظرمقدار به حد کافی برسد تا بتوان روی آن آزمایشهایی مثل الکتروفورز، هیبریداسیون با پروب و توالی یابی (Sequencing) و ... را انجام داد.
- Real-time PCR : به طور کلی Real Time PCR تکنیکی برای مشاهده بیوقفهی پیشرفت واکنش PCR در طول زمان میباشد. همچنین با این روش میتوان مقادیر تولیدات PCR (mRNA، DNA، cDNA) را نیز اندازه گیری نمود. این روش بر مبنای فلوروسنت تولیدی از مولکول گزارشگر (Reporter) میباشد که در طول واکنش افزایش مییابد. مولکولهای گزارشگر فلوروسنت یا به صورت رنگ هایی میباشند که به DNA دو رشته ای باند میشوند، مانند SYBR® Green و یا بصورت شناساگرهای توالی های خاص مانند TaqMan® Probes میباشند. این تکنیک علاوه بر دقت و حساسیت بالا میتواند با حداقل اسید نوکلئیک آغاز شود و مقدار تولید نهایی را با دقت زیادی تعیین نماید.
کاربردهای Real-time PCR :
- تحقیقات میزان بیان
- اندازه گیری میزان همانندسازی DNA در ژنوم یا DNA ویروسی
- میزان تاثیر دارو درمانی
- سنجش آسیب های DNA
- تشخیص عوامل بیماری زا
- تعیین ژنوتایپ افراد
- سنجش تفکیک شدن آللی
- Western Blot : وسترن بلات که همچنین بعنوان ایمونوبلاتینگ یا پروتئین بلاتینگ نیز شناخته شده است، یکی از تکنیکهای کلیدی در زیست شناسی سلولی و مولکولی است و معمولا برای شناسایی حضور پروتئینهای خاصی در مجموعهای از پروتئینهای سلولی به کار میرود. فرآیند این تست به سه فاکتور اساسی بستگی دارد:
- جداسازی کل پروتئینها بر اساس اندازه با استفاده از الکتروفورز پروتئین در ژل
- انتقال کافی پروتئینهای جداشده به یک بستر جامد عموماً صفحهی نیتروسلولز
- شناسایی اختصاصی پروتئین هدف با آنتی بادی مناسب
این روش به خصوص برای پروتئین های با غلظت پایین مناسب است.
- Immunohistochemistry : ایمونوهیستوشیمی یک تکنیک اساسی است که در بسیاری از آزمایشگاه‌ها برای اهداف تشخیصی و پژوهشی استفاده می‌شود. این روش ترکیبی از تکنیکهای ایمونولوژی، بافت‌شناسی و بیوشیمیایی است که برای تشخیص اختصاصی اجزای (آنتی‌ژن‌های پروتئینی) بافت‌ها، بواسطه آنتی‌بادی‌های کنژوگه شده از طریق یک واکنش آنتی‌ژن- آنتی‌بادی، استفاده می‌شود. بعد از اتصال آنتی‌بادی کنژوگه شده به آنتی‌ژن هدف در سطح بافت و تولید یک محصول رنگی طی واکنش هیستوشیمی (رنگزا)، با میکروسکوپ نوری یا میکروسکوپ فلوروکروم و با نور ماوراء بنفش (UV) میتوان محصول رنگی را که در واقع محل بیان آنتی‌ژن موردنظر است، تشخیص داد.
کاربرد های ایمونوهیستوشیمی:
تشخیص و درمان تومور‌ها و سلولهای سرطان
- تشخیص فرآیند تمایز بافت‌ها از طریق شناسایی مارکرهای سطحی
- در تحقیقات و پژوهش‌ها در زمینه های مختلف پزشکی
- تشخیص سرطان‌های اولیه ناشناخته
- ELISA Reader : «الایزا ریدر» یا خوانشگر الایزا که به اسامی «میکروپلیت ریدر» و «خوانشگر میکروپلیت فتومتریک» نیز معروف است، یک اسپکتروفتومتر تخصصی بوده که به منظور قرائت نتایج تست الیزا طراحی شده است. این وسیله به منظور تعیین حضور آنتی بادی ها یا آنتی‌ژن های اختصاصی در نمونه ها به کار میرود. این تکنیک بر اساس تشخیص یک آنتی‌ژن یا آنتی بادی ها روی یک سطح جامد به صورت مستقیم یا ثانویه به کمک آنتی بادی های نشاندار و ایجاد محصولاتی استوار است که می‌توانند توسط اسپکتروفتومتر خوانده شوند. واژه الایزا ELISA، اختصاری از کلمات Enzyme-Linked Immuno sorbent Assay است.
2- بیوشیمیایی:
تکنیک های آزمایشگاهی:
-
اسپکتروفوتومتری: طیفسنجی نوری یا اسپکتروفوتومتری در شیمی، روشی است برای سنجش و مطالعه ی طیف الکترومغناطیسی. در این روش با استفاده از میزان اندازه ی جذب نور نمونه هاا، غلظت آنها را تعیین میکنند. همچنین از آن میتوان برای تجزیه و تحلیل نمونه های DNA ، RNA استفاده نمود.
3- آنالیز تنفسی :
تکنیک های آزمایشگاهی:
-
FeNo سنجی
-
CO سنجی
-
H2O2 سنجی
-
اندازه گیری بیو مارکرهای میعانات هوای بازدمی ( Exhaled Breath Condensate Analysis)
4- کشت سلولی:
یکی از اهداف کشت سلولی مطالعه ی سلول ها از نظر نحوهی رشد، نیازهای غذایی و علل توقف رشد آنها است. بنا بر این برای مطالعهی چرخهی رشد سلولی، توسعهی روشهای کنترل رشد سلولهای سرطانی و تعدیل بیان ژن ها نیاز به کشت این سلولها در محیط خارج بدن می باشد. به طور خلاصه به کمک کشت سلولی میتوان سلول های همسانی تهیه نمود و فعالیت های داخل سلولی از قبیل تکثیر DNA، نسخه برداری از DNA، سنتز RNA و پروتئین و سایر جزئیات مربوط به متابولیسم را مطالعه کرد. همچنین میتوان پس از اتصال مولکولهای مختلف به گیرندههای غشایی مربوطه ، اتفاقات بعدی و جریانات داخل سلولی از قبیل جابجایی این کمپلکس ها، نوع پیامدهی داخل سلولی و نحوهی انتقال پیام ها را بررسی نمود.