يکشنبه 2 مهر 1396 - 03 محرم 1439
جستجو :
  آزمایشگاه بیولوژی مولکولی
 
اهداف مهم : تحقیقات بالینی- مولکولی در ارتباط با بیماری های ریه
هدف، انجام تحقیقات بالینی پیشگامانه و نوآورانه در زمینه­ی بیماری­های ریوی شامل: آسم، بیماری­های انسدادی مزمن ریوی  (COPD)، سرطان ریه ، فشارخون ریوی (PAH) ، سل و سایر بیماری­های مرتبط با ریه و در ارتباط با بیولوژی مولکولی است. این مرکز تحقیقات گسترده­ای در پیشبرد تشخیص، پیشگیری، درمان و کنترل بیماری­ها بعمل می آورد تا قدم­های قابل قبولی در ارتقا سلامت ملی و جهانی بردارد. در این زمینه با ایجاد تسهیلات و ظرفیت های لازم، در انجام آموزش و پژوهش محققین از جمله دانشجویان کارشناسی ارشد و دکترا را به منظور دستیابی به اهداف مهم یاری می­رساند.
 

اهداف آزمایشگاه:
 
1- پزشکی- مولکولی:
    
تکنیک­های آزمایشگاهی:
  1. PCR (Polymerase Chain Reaction): PCR  به علت دارا بودن ویژگی و حساسیت بالا و سرعت و سهولت آن،  جایگاه ویژه­ای درتحقیقات و تشخیص های مولکولی پیدا کرده است.PCR  در محیط آزمایشگاه امکان تکثیر یک توالی معین از DNA را که بین دو توالی مشخص قراردارد، امکان پذیر می­کند تا DNA از نظرمقدار به حد کافی برسد  تا بتوان روی آن آزمایش­هایی مثل الکتروفورز، هیبریداسیون با پروب و توالی یابی (Sequencing) و ... را انجام داد.
  2. Real-time PCR :  به طور کلی Real Time PCR تکنیکی برای مشاهده بی­وقفه­ی پیشرفت واکنش PCR در طول زمان می­باشد. همچنین با این روش می­توان مقادیر تولیدات  PCR (mRNA، DNA، cDNA)  را نیز اندازه گیری نمود. این روش بر مبنای فلوروسنت  تولیدی از مولکول گزارشگر (Reporter) می­باشد که در طول واکنش افزایش می­یابد. مولکول­های گزارشگر فلوروسنت یا به صورت رنگ هایی می­باشند که به DNA دو رشته ای باند می­شوند، مانند SYBR® Green و یا بصورت شناساگرهای توالی های خاص مانند TaqMan® Probes  می­باشند. این تکنیک علاوه بر دقت و حساسیت بالا می­تواند با حداقل اسید نوکلئیک آغاز شود و مقدار تولید نهایی را با دقت زیادی تعیین نماید
کاربردهای Real-time PCR :
  • تحقیقات میزان بیان
  • اندازه گیری میزان همانندسازی DNA در ژنوم یا DNA ویروسی
  • میزان تاثیر دارو درمانی
  • سنجش آسیب های DNA
  • تشخیص عوامل بیماری زا
  • تعیین ژنوتایپ افراد
  • سنجش تفکیک شدن آللی
 
  1. Western Blot : وسترن بلات که همچنین بعنوان ایمونوبلاتینگ یا پروتئین بلاتینگ نیز شناخته شده است، یکی از تکنیک­های کلیدی در زیست شناسی سلولی و مولکولی است و معمولا برای شناسایی حضور پروتئین­های خاصی در مجموعه­ای از پروتئین­های سلولی به کار می­رود. فرآیند این تست به سه فاکتور اساسی بستگی دارد:
  1. جداسازی کل پروتئین­ها بر اساس اندازه با استفاده از الکتروفورز پروتئین در ژل
  2. انتقال کافی پروتئین­های جداشده به یک بستر جامد عموماً صفحه­ی نیتروسلولز
  3. شناسایی اختصاصی پروتئین هدف با آنتی بادی مناسب
این روش به خصوص برای پروتئین های با غلظت پایین مناسب است.

  1. Immunohistochemistry :  ایمونوهیستوشیمی یک تکنیک اساسی است که در بسیاری از آزمایشگاه‌ها برای اهداف تشخیصی و پژوهشی استفاده می‌شود. این روش ترکیبی از تکنیک‌های ایمونولوژی، بافت‌شناسی و بیوشیمیایی است که برای تشخیص اختصاصی اجزای (آنتی‌ژن‌های پروتئینی) بافت‌ها، بواسطه آنتی‌بادی‌های کنژوگه شده از طریق یک واکنش آنتی‌ژن- آنتی‌بادی، استفاده می‌شود. بعد از اتصال آنتی‌بادی کنژوگه شده به آنتی‌ژن هدف در سطح بافت و تولید یک محصول رنگی طی واکنش هیستوشیمی (رنگزا)، با میکروسکوپ نوری یا میکروسکوپ فلوروکروم و با نور ماوراء بنفش (UV) می‌توان محصول رنگی را که در واقع محل بیان آنتی‌ژن موردنظر است، تشخیص داد.
کاربرد های ایمونوهیستوشیمی:
تشخیص و درمان تومور‌ها و سلول‌های سرطان
  • تشخیص فرآیند تمایز بافت‌ها از طریق شناسایی مارکر‌های سطحی
  • در تحقیقات و پژوهش‌ها در زمینه های مختلف پزشکی
  • تشخیص سرطان‌های اولیه ناشناخته 
 
  1. ELISA Reader : «الایزا ریدر»  یا خوانشگر الایزا که به اسامی «میکروپلیت ریدر» و «خوانشگر میکروپلیت فتومتریک» نیز معروف است، یک اسپکتروفتومتر تخصصی بوده که به منظور قرائت نتایج تست الیزا طراحی شده است. این وسیله به منظور تعیین حضور آنتی بادی ها یا آنتی‌ژن های اختصاصی در نمونه ها به کار می‌رود. این تکنیک بر اساس تشخیص یک آنتی‌ژن یا آنتی بادی ها روی یک سطح جامد به صورت مستقیم یا ثانویه به کمک آنتی بادی های نشاندار و ایجاد محصولاتی استوار است که می‌توانند توسط اسپکتروفتومتر  خوانده شوند. واژه الایزا ELISA، اختصاری از کلمات Enzyme-Linked  Immuno  sorbent  Assay است.

  2- بیوشیمیایی:

تکنیک های آزمایشگاهی:
  1. اسپکتروفوتومتری: طیف­سنجی نوری یا اسپکتروفوتومتری در شیمی، روشی است برای سنجش و مطالعه ی طیف الکترومغناطیسی. در این روش با استفاده از میزان اندازه ی جذب نور نمونه هاا، غلظت آنها را تعیین می­کنند. همچنین از آن می­توان برای تجزیه و تحلیل نمونه های DNA ، RNA استفاده نمود.
     
 
3- آنالیز تنفسی :
 
تکنیک های آزمایشگاهی:
  1. FeNo سنجی
  2. CO سنجی
  3. H2O2 سنجی
  4. اندازه گیری بیو مارکرهای میعانات هوای بازدمی ( Exhaled Breath Condensate Analysis)
     
 
4- کشت سلولی:
یکی از اهداف کشت سلولی مطالعه ی سلول ها از نظر نحوه­ی رشد، نیازهای غذایی و علل توقف رشد آنها است. بنا بر این برای مطالعه­ی چرخه­ی رشد سلولی، توسعه­ی روش­های کنترل رشد سلول­های سرطانی و تعدیل بیان ژن ها نیاز به کشت این سلول­ها در محیط خارج بدن می باشد. به طور خلاصه به کمک کشت سلولی می­توان سلول های همسانی تهیه نمود و فعالیت های داخل سلولی از قبیل تکثیر DNA، نسخه برداری از DNA، سنتز RNA و پروتئین و سایر جزئیات مربوط به متابولیسم را مطالعه کرد. همچنین می­توان پس از اتصال مولکول­های مختلف به گیرنده­های غشایی مربوطه ، اتفاقات بعدی و جریانات داخل سلولی از قبیل جابجایی این کمپلکس ها، نوع پیام­دهی داخل سلولی و نحوه­ی انتقال پیام ها را بررسی نمود.
نوشته شده توسط   بابک زارع آبادی